Y
a
o
H
a
i
B
I
O
P
h
a
r
m
a
纳米抗体(Nanobody,Nb)， 即重链单域抗体VHH (variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody)，是由比利时科学家于1993年在自然杂志中报道，是骆驼科动物(骆驼，大羊驼，羊驼及其近亲物种)缺失轻链的天然重链抗体的可变区（VHH）组成的单域抗体，该抗体只包含一个重链可变区（VHH）和两个常规的CH2与CH3区。 VHH晶体为直径2.5nm、长4nm的圆柱体，分子量只有15 KDa，因此也被称作纳米抗体（Nanobody, Nb）。
图片来源：International Journal of Nanomedicine 2016:11 3287–3303
得益于纳米抗体微小的结构、完整的抗原识别能力以及噬菌体筛选技术，纳米抗体表现出高亲合力、高特异性、强穿透性和易于基因改造和表达等特点，并且由于可以获得抗体完整序列，纳米抗体可以通过体外重组表达高质量稳定生产，有效避免传统抗体的批次间差异问题。纳米抗体的物理和化学稳定性，可为诊断和治疗提供新的研究工具，在抗体药物研发、医学基础研究以及疾病诊断、癌症和感染性疾病治疗等领域展现出了广阔的应用前景。
与靶点结合特异性更强
组织穿透力更强
开发周期短，稳定性更高
制备简单，适合工业化大规模生产
可在微生物中高效大量表达
更容易人源化
巴黎人贵宾会拥有丰富的纳米抗体研发及生产经验，以强大的技术平台、先进的生产设备以及在纳米抗体全生态表达系统的开创性技术，致力于为客户提供从菌株构建、多功能纳米抗体表达与纯化，及规模化生产的一站式纳米抗体研发生产服务，满足客户不同实验或项目需求。
E.coli 原核表达系统
酵母真核表达系统（毕赤酵母）
哺乳动物细胞表达系统
单域纳米抗体、二价纳米抗体、多价纳米抗体
齐全纯化平台，组合式纯化方式，高效灵活
纳米抗体较高表达量10g/L
服务规模7-2000L
目前，巴黎人贵宾会建立了全生态的纳米抗体表达体系，现有的表达系统包括：E.coli 原核表达系统、酵母表达系统（毕赤酵母）、哺乳动物细胞表达系统（科研级样品制备），熟练运用多种表达宿主菌，根据客户的实际需求，为客户提供适合且高质量的表达体系。
大肠杆菌表达系统是基因表达技术中发展早、应用广且经济实惠的经典表达系统。大肠杆菌具有遗传背景清楚、细胞增殖快、表达量高、稳定性好和抗污染能力强等特点。
纳米抗体的分子质量小、结构简单，能被单个基因编码，利用基因工程能在大肠杆菌等原核微生物中大量表达。
巴黎人贵宾会可以利用大肠杆菌在胞质或者通过信号肽周质空间表达纳米抗体，成功表达的纳米抗体种类超20种。
酵母表达系统，是工业生产中应用较为广泛的系统，其遗传背景清楚安全，兼具原核和真核表达系统的优点：增殖快、可在廉价培养基中进行高密度发酵、能进行复杂的翻译后修饰、且分泌表达能力强大，有效降低下游纯化成本。纳米抗体的分子质量小、结构简单，能被单个基因编码，利用基因工程能在酵母菌等微生物中大量表达。
巴黎人贵宾会可提供纳米抗体高表达菌株的筛选与发酵工艺开发服务，采用高密度发酵，利用毕赤酵母PAOX1诱导表达纳米或PGAP组成型表达10余种不同纳米抗体，表达量可达到10 g/L以上。
哺乳动物细胞表达系统能够指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面，接近于天然的高等生物蛋白质分子。
巴黎人贵宾会可利用哺乳动物细胞CHO系列细胞，通过瞬转方法或构建稳转株来表达多种不同纳米抗体。利用CHO系列细胞瞬转表达纳米抗体，表达量可达20mg/L；利用CHO系列细胞稳转株表达纳米抗体，表达量可达15mg/L。
由客户提供纳米抗体基因序列或氨基酸序列，自主选择表达宿主细胞，巴黎人贵宾会提供从基因合成至纳米抗体表达与纯化、及规模化生产的一站式纳米抗体研发生产服务。
| 步骤 | 服务内容 | 周期 | 交付 |
| 纳米抗体表达工程菌构建（可以选择毕赤酵母，大肠杆菌或者哺乳动物细胞） | 1.大肠杆菌表达系统（胞质或周质空间表达） 2.毕赤酵母表达系统（可以选用甲醇诱导型表达系统PAOX1或者组成型表达系统PGAP） 3.哺乳动物表达系统（通过瞬转或者稳转来表达纳米抗体） |
大肠杆菌1-2周（不包括基因合成周期） 毕赤酵母2-3周 哺乳动物瞬转1-2周 稳转株2个月左右 |
纯化得到的纳米抗体，纯化抗体检测报告SDS-PAGE，SEC-HPLC（选做）、RP-HPLC（选做）和CE-SDS（选做）纯度分析方法 |
| 小量表达纯化（标签） | 对构建的工程菌纳米抗体表达，对1L表达体积的蛋白进行纯化（推荐加标签）。 | 2-3周 | |
| 大规模表达纯化 | 大规模发酵纳米抗体样品，同时对于发酵的纳米抗体进行表达纯化。 | 5-8周 |
成熟的纳米抗体表达纯化平台，以丰富的技术及项目经验，提供一站式服务。
强大的技术服务团队，具备丰富生物学技术背景，以博士为主导的表达纯化平台，提供一对一专项技术服务。
具备稳定的原核细胞E.Coli 、真核毕赤酵母及哺乳动物细胞CHO等纳米抗体表达平台，客户可根据需求灵活选择表达平台，减少试错成本。
具备深厚纳米抗体质量评价体系经验，建立SDS-PAGE、SEC-HPLC、RP-HPLC及基于毛细管电泳的CE-SDS等多种纯度分析方法。
丰富纳米抗体纯化经验，积累亲和层析、离子层析、疏水层析等多种纯化方式，可对不同纯化方案灵活组合，实现纯度≥98%。
可提供7-2000L的服务规模。
Y
a
o
H
a
i
B
I
O
P
h
a
r
m
a
Copyright © 江苏巴黎人贵宾会制药有限公司 - All Rights Reserved 备案号：苏ICP备15390591号-1 技术支持：网站维护
