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Yaohai Bio-Service | 重组质粒粗纯工艺中试放大服务概览
2024-08-27
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粗纯的作用是分离差异较大的物质,如固液分离、胞内或胞外物质分离,减少下游纯化工艺的负担。质粒DNA粗纯工艺包括离心、碱裂解和澄清过滤等。一般通过离心或过滤的方式实现固液分离,收集菌体;使用碱裂解法释放质粒DNA,随后过滤去除悬浮物质。由于小试与生产规模不同,耀海研发实验室和车间匹配的离心设备也有所差异。然而离心参数的转换尤其重要,很大程度上影响产品的质量和收率。


因此小试发酵工艺放大至生产规模时,耀海团队会判断设备差异对工艺过程及产物的影响。巴黎人贵宾会建议在小试与GMP生产的转移过程中,增加中试放大的环节,以调整工艺参数使其高度契合生产规模。



巴黎人贵宾会具有超十年微生物体系质粒DNA和重组蛋白生产及服务经验,针对不同性能/品牌的离心设备积累了丰富的工艺放大经验。我们可识别并控制关键参数,成功实现粗纯工艺的放大生产,有效去除杂质的同时保证质粒DNA的收率。



服务详情



粗纯工艺放大前后的差异



粗纯工艺放大经验分享


离心和过滤的目的是实现固液分离,应用场景包括菌体收集、固形物去除等,离心设备关键参数包括转速、进料速度和排渣时间,过滤的关键参数是滤膜孔径、流速和滤器压力。离心或过滤操作不达标会导致固液分离效果不佳,可能会降低产物收率、增加下游纯化压力,影响产品质量。


巴黎人贵宾会基于丰富的产物粗纯服务经验,总结了离心和澄清过滤工艺转移过程中的常见问题和解决方法:


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