随着肿瘤靶向诊疗技术的发展，目前已发现多种类型的生物分子能够与放射性核素结合发挥靶向作用。其中抗体是一种备受关注的候选分子，主要基于其对肿瘤抗原的高亲和力和高特异性。然而传统的单克隆抗体分子量和体积过大，导致其肿瘤穿透力低、血液清除率低，因而无法全面应用于基于放射性核素的肿瘤成像或治疗。如今，来源于骆驼科动物重链抗体的可变结构域（VHH），也称为纳米抗体（Nbs），逐渐发展为首选的肿瘤靶向分子探针。

纳米抗体作为肿瘤靶向分子探针的优劣势

纳米抗体由天然重链抗体（HcAbs）衍生而来。天然重链抗体分子量约为95 kDa，天然存在于骆驼科动物体内，如双峰驼、骆马、单峰骆驼和大羊驼。与两条重链和两条轻链组成的常规IgG抗体相比，HcAb只具有重链，缺乏CH1结构域。但HcAb的抗原结合亲和力并不受抑制。常规IgG抗体中，抗原结合位点包含一个轻链和一个重链可变结构域，而在HcAb中，抗原结合片段仅由一个重链抗体的重链可变域（VHH）组成。VHH区域是抗原结合的单位，也成为纳米抗体。

纳米抗体在肿瘤成像方面具备独特优势，详细如下：

纳米抗体的优劣势分析

纳米抗体的优势低分子量

纳米抗体的分子量在12~15 kDa之间，是自然存在的抗原结合可变结构域。

1.高穿透力

纳米抗体的低分子量、小尺寸有助于其穿透至组织和实体瘤。而且，纳米抗体的序列具有多变性。以上特征允许纳米抗体进入靶向组织，并有效地结合到位于凹表面的表位上，这是常规抗体无法实现的。

2.高抗原特异性和亲和力

纳米抗体存在抗原结合区域，保留了常规抗体靶向目标抗原的高特异性和亲和力。纳米抗体包括3个互补决定区（CDR），发挥抗原的特异性和高亲和性。而传统抗体则包含6个CDRs。但纳米抗体CDR3区域更长，提供更大的抗原结合表面，一定程度上弥补了轻链VL缺失造成的抗原结合力下降。

3.高亲水性和溶解性

纳米抗体与IgG抗体VH区域的另一个差异在于骨架区FR2。传统单克隆抗体的FR2中，V42、G49、L50和W52这4个氨基酸残基参与VL的相互作用；而在纳米抗体中，4个氨基酸分别突变为F42、E49、R50、G52，由疏水氨基酸突变为亲水氨基酸，提高了纳米抗体的亲水性、溶解度和稳定性。

4.低聚集性

在IgG抗体及其衍生物中，VH结构域的疏水残基可能会导致分子内聚集。而纳米抗体中疏水残基替换为了亲和性残基，因此导致的聚集效应低。

5.高稳定性

纳米抗体具有pH稳定性、高耐热性和抗蛋白水解特性。多项研究报道，纳米抗体在在多种极端条件下仍保持抗原结合能力，包括极低温（-20℃）、极高温（20℃）、高压、pH值变化和化学变性剂。同时，纳米抗体能够抵抗胃肠道蛋白质水解酶的降解，具有口服给药的潜在应用。

6.水剂开发特性

基于纳米抗体在物理化学特殊条件下的高度稳定性，纳米抗体可以配制成长保质期的水剂，储存时间长达数月。

7.高清除率

多种结构特征有利于纳米抗体的快速清除，尤其是通过肾脏途径。例如，纳米抗体不含IgG抗体的可结晶片段（Fc）、小分子量和高度亲水性。纳米抗体用于肿瘤成像示踪剂时，血液中的未结合示踪剂可快速清除。

8.低免疫原性

纳米抗体与人IgG抗体的VH结构域具有高度同源性，有研究人员针对纳米抗体进行了人源化改造，以消除其免疫原性。

9.变性后重折叠能力

纳米抗体一般具备1个或2个二硫键，结构简单，因此纳米抗体变性后可以重折叠恢复原始构象。

10.可行的生产工艺

由于纳米抗体由单域结构区域的单体组成，单价、多价和双特异性结构的形成同样不涉及复杂的翻译后修饰，因此多种表达系统可用于纳米抗体的生产，包括细菌、酵母等微生物宿主，其生产成本可以有效控制。当前重组疫苗、重组多肽、重组蛋白等生物制品已建立了成熟的工艺，有助于推动纳米抗体的大规模生产。

此外，纳米抗体与其他蛋白质、药物、毒素、胶束、聚合物或放射性金属的偶联也是可行的。

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